一种羧甲基纤维素钠医用生物胶液及其制备方法

【技术领域】

[0001]本发明属于生物组织工程和医用材料领域，涉及一种羧甲基纤维素钠医用生物胶液及其制备方法。

【背景技术】

[0002]创面修复是人类最古老的医学问题之一。随着社会发展，创面修复不仅存在愈合与否及愈合时间长短的问题，创面愈合后对机体功能和美观的影响也逐渐被人们关注。组织受到创伤后，局部血管收缩、血液和细胞渗出以及血管活性因子激活等诱发凝血过程。血凝块提供了供细胞黏附和迀移的基质。血小板不仅参与凝血过程，还是生长因子和促炎症因子的重要来源，这些生物活性物质可进一步诱导炎症细胞和成纤维细胞向创面迀移。创面修复是一个复杂而有规律的生物学过程，主要包括炎症反应、细胞增殖和组织重塑阶段，它在机体的调控下呈现高度的有序性、协调性、完整性和网络性。炎症反应并不局限于炎症反应期，而是贯穿创面修复的整个过程，其作用过强或过弱均不利于创面修复。

[0003]羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose，CMC)，是一种很好的术后防粘连材料，它是一种天然的高分子材料，具有良好的生物相容性、血液相容性以及天然的药物活性，并可降解、可被机体吸收、无毒、无害、也不易引起非感染性炎症。甲壳素(chitin)是N-乙酰基-D-葡萄糖胺以β-1，4键结合而成的多糖，是蟹、虾等甲壳类、甲虫等的外骨骼及蘑菇等菌类的细胞壁成分，广泛存在于自然界。壳聚糖(chitosan)是甲壳素脱去乙酰基的产物，安全无毒具有良好的生物兼容性，与人体细胞有良好的亲和性，无免疫原性，具有抗癌和抗肿瘤的作用。壳聚糖及其衍生物因其特有生物活性对多种细菌、真菌具有广谱抗菌的功能，生物医药方面的应用逐渐得到重视。

[0004]因此，开发出一种性能良好的含有壳聚糖微球羧甲基纤维素钠医用生物胶液，并且探寻及其高效的制备方法，将广泛造福于患者并具备良好的市场前景。

[0005]CN 201410324409.9中公开了一种羧甲基纤维素钠制备止血、防粘性、促创面愈合材料工艺，其将羧甲基纤维素钠与注射用水机械混合制得止血、防粘性、促创面愈合材料，由于只是单一的使用羧甲基纤维素钠，使其在创面修复过程中不能起到长久持续的抑菌和促进创面愈合。

【发明内容】

[0006]本发明属于生物组织工程和医用材料领域，尤其涉及一种羧甲基纤维素钠医用生物胶液及其制备方法。其特征在于该方法包括如下技术方案:

[0007]1、所需载有生长因子的壳聚糖微球的制备，步骤如下:

[0008](I)载药壳聚糖溶液的配制:先配制浓度为5%的乙酸溶液作溶剂，将壳聚糖(Mw=IX 15?3Χ 10 5g.mor1,脱乙酰度彡88% )溶解于该乙酸溶液中，配制成5?8wt%的壳聚糖溶液，经过充分搅拌，以至完全溶解;称取占壳聚糖量I?5%的生长因子于壳聚糖溶液中，继续搅拌，以至药物完全溶解;将溶液静置到气泡全部析出，成均匀透明溶液即得到载药壳聚糖溶液。

[0009](2)载药壳聚糖微球的制备:在室温下，将步骤(I)中的壳聚糖溶液置于纺丝注射器中，通过微量进样泵控制挤出速度为0.5mL/h ;电喷雾的电压为20?30kV，电喷雾喷头至接收器的距离为20cm ;采用装有乙醇溶液的容器为收集装置，纺丝结束后，将纺丝溶液在温度为T = 40°C下真空干燥即得载药壳聚糖微球，壳聚糖微球的粒径为50?200nm。

[0010]2、羧甲基纤维素钠医用生物胶液的制备，步骤如下:

[0011](I)制备浓度为0.6?0.9% (w/v)氯化钠超净水溶液，向水中加入羧甲基纤维素钠，羧甲基纤维素钠的水溶液浓度在I?5%之间，开启恒温箱，在温度为T = 60?80°C下机械搅拌，直至羧甲基纤维素钠全部溶解;

[0012](2)向步骤(I)的溶液中加入占羧甲基纤维素钠质量10?30%的载有生长因子的壳聚糖微球，加速搅拌，搅拌时间为6?8h ;

[0013](3)将步骤⑵制得的溶液转移到高温蒸汽灭菌箱中，温度为T = 110?130°C，灭菌时间为30min左右;

[0014](4)送至下一步工序分装，在检测符合产品标准后，进行包装，制成成品。

[0015]上述步骤中所述的生长因子为重组人表皮生长因子、转化生长因子、重组牛碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子中的一种或几种。

[0016]本发明的优点:

[0017]1、本发明采用的是利用电喷雾技术制备载有药物的壳聚糖纳米微球，微球粒径小，药物包覆率高;

[0018]2、本发明所选原料生物相容性好，环境友好，没有过多的助剂、有机溶剂、对接触的创面无刺激性。

[0019]3、本发明操作工序简单，原料易得，成本低廉，

【具体实施方式】

[0020]实施例1

[0021]所需载有生长因子的壳聚糖微球的制备:先配制浓度为5%的乙酸溶液作溶剂，将壳聚糖(Mw = IXlO5g.πιοΓ1，脱乙酰度彡88% )溶解于该乙酸溶液中，配制成5被%的壳聚糖溶液，经过充分搅拌，以至完全溶解;称取占壳聚糖量I %的重组人表皮生长因子于壳聚糖溶液中，继续搅拌，以至药物完全溶解;将溶液静置到气泡全部析出，成均匀透明溶液即得到载药壳聚糖溶液。在室温下，将壳聚糖溶液置于纺丝注射器中，通过微量进样泵控制挤出速度为0.5mL/h ;电喷雾的电压为20kV，电喷雾喷头至接收器的距离为20cm ;采用装有乙醇溶液的容器为收集装置，纺丝结束后，将纺丝溶液在温度为T = 40°C下真空干燥即得载药壳聚糖微球，壳聚糖微球的粒径为50?200nm。

[0022]羧甲基纤维素钠医用生物胶液的制备:制备浓度为0.6% (w/v)氯化钠超净水溶液，向水中加入羧甲基纤维素钠，羧甲基纤维素钠的水溶液浓度在1%之间，开启恒温箱，在温度为T = 60°C下机械搅拌，直至羧甲基纤维素钠全部溶解;向溶液中加入占羧甲基纤维素钠质量10%的载有生长因子的壳聚糖微球，加速搅拌，搅拌时间为6h ;将制得的溶液转移到高温蒸汽灭菌箱中，温度为T = 110°C，灭菌时间为30min左右;送至下一步工序分装，在检测符合产品标准后，进行包装，制成成品。

[0023]实施例2

[0024]所需载有生长因子的壳聚糖微球的制备:先配制浓度为5%的乙酸溶液作溶剂，将壳聚糖(Mw = IXlO5g.πιοΓ1，脱乙酰度彡88% )溶解于该乙酸溶液中，配制成5被%的壳聚糖溶液，经过充分搅拌，以至完全溶解;称取占壳聚糖量2 %的重组人表皮生长因子于壳聚糖溶液中，继续搅拌，以至药物完全溶解;将